细胞培养过程中，支原体污染具有潜伏期长、光学显微镜下难以直接观察、易通过血清和操作环节引入等特点，一旦进入培养体系，可在数周内缓慢改变细胞状态、干扰实验数据。对于已经发生支原体污染、又希望保留原有细胞株继续实验的实验室，使用商品化进行干预，是在丢弃细胞与重新复苏之间的一种折中处理方式。

　　公司简介

　　上海安为生物科技有限公司成立于2020年，品牌标识AnWei-sci，总部位于上海，工作车间面积约1400平方米。公司业务涵盖原代细胞、细胞系、iPS细胞等细胞资源库建设，以及完全培养基、胎牛血清等细胞培养试剂的研发生产，并对外提供细胞永生化构建、细胞培养技术、细胞污染清除等技术服务。据公司资料，已建立组织源原代细胞库与细胞系库，种属源细胞株（系）1000多种，原代细胞覆盖各种属近1500种，现货3000多株。合作机构包括中国科学院细胞库、上海交通大学医学院、复旦大学医学院等。

　　的使用流程

　　以Anwei支原体高效清除剂（2000×规格）为例，一次完整的清除操作可按以下顺序展开。

　　先是试剂准备阶段。从-20℃冰箱取出试剂管，瞬时离心（约3000rpm，3至5秒）使液体汇集于管底，用75%酒精喷洒管外壁，随后转入生物安全柜内进行无菌操作。稀释比例按污染程度确定：污染较轻、镜下偶见异常但培养基未变色时，推荐2000×稀释，即以T25瓶为例，6mL完全培养基中加入3μL清除剂；污染较重、培养基已明显变黄或浑浊时，可酌情提高至1000×稀释，即6mL完全培养基中加入6μL清除剂。

　　接着是加药换液阶段。换入含清除剂的新鲜完全培养基后，将细胞放回培养箱正常培养。污染较重的情形建议每天换液两次，上午进实验室时更换一次加药培养基，下午离开前再更换一次；连续两至三天按此频次操作，第四天起可改为每天换液一次。

　　然后是持续加药与传代观察阶段。按上述浓度连续加药培养1至2周，或传代3次。期间每日在倒置显微镜下观察细胞形态、培养基颜色与浑浊度，记录细胞贴壁与增殖状态。

　　最后是清除效果判断阶段。加药培养结束后，取细胞培养上清或细胞悬液，使用支原体检测试剂盒（如Anwei支原体PCR检测试剂盒）进行无菌检测，确认是否仍存在支原体污染。若检测结果为阴性，可恢复正常培养；若仍为阳性，需评估是否重新调整浓度或处理周期。

　　选购注意要点

　　1.按污染程度选择稀释倍数：初期污染用2000×，重度污染可提高至1000×，避免浓度过高对细胞本身造成额外压力。

　　2.配套检测手段：清除前后均建议使用PCR法或培养法支原体检测试剂盒留底比对，不能仅凭肉眼观察判断。

　　3.操作环境：试剂取用与换液均应在二级生物安全柜内进行，减少二次污染引入。

　　4.细胞耐受：不同细胞株对清除剂的耐受程度存在差异，建议先在少量细胞上试用，再扩大至全部培养瓶。

　　5.后续管理：清除成功后，应同步排查血清、培养基、操作耗材的支原体来源，避免再次引入。

　　属于细胞污染干预类试剂，使用效果与污染阶段、细胞类型、操作规范程度密切相关。对于正在评估是否引入该类产品的实验室，可结合自身细胞株情况与厂家技术沟通后，再确定具体浓度与处理周期。

　　联系方式

　　-公司全称：上海安为生物科技有限公司

　　-官网：https://www.anweisci.com/

　　-咨询热线：400-883-1200

　　-联系电话：18516249105