在制备型液相色谱（Prep-HPLC）实验中，色谱分离只是其中一步，馏分收集直接决定了你能不能拿到有效的目标产物。然而，它的收集方式有好几种，什么时候该按时间收集？什么时候等峰出来再触发收集？……都需要我们的辨别。

馏分收集策略选对了，可以大幅提升目标产物纯度、减少样品损失、节约溶剂与实验时间；而收集模式选择不当，则很容易出现目标馏分漏收、杂质混入、馏分交叉污染、产物回收率下降等一系列问题。

本文就来解析下实验室常用的几大类馏分收集方式，同时带大家了解下一台高性能制备液相色谱设备，应当具备哪些丰富的收集功能。

一、全收集，方法开发阶段的有效手段

全收集模式可以用“简单粗暴”来概括，色谱运行启动之后，所有流出液不分段、不筛选，全部按照预设顺序依次收入试管中，不会有流出液直接排入废液。乍听之下，这种做法既不高效也不经济，但在样品成分未知（分析一个新化合物或天然产物提取物）、方法开发初期（在摸索梯度条件或筛选色谱柱）、教学演示或方法对比（展示整个色谱过程的全貌）中却是有效手段。

【优点】：1、操作简单，几乎不需要设置触发参数，新手友好；2、不用担心漏收目标峰；3、后期可以根据色谱图谱结果，回头再从收集好的试管里筛选目标馏分。

【缺点】：试管数量多、后续检测工作量大。

万立小建议：全收集可作为“探索工具”，摸清样品组成和出峰规律后，应切换到更有效的收集模式来提高效率。

二、阈值收集，常用的自动化方式

阈值收集是目前制备纯化当中常用且高效的自动收集方式。系统通过检测器（UV/DAD）实时监测信号强度，操作者预先设定一个信号阈值——当检测信号达到该阈值时，系统判定目标峰到达，自动启动收集；当信号回落至阈值以下时，系统自动切换至废液通道。

【优点】：1、准确锁定色谱峰，节省收集管；2、自动化程度高，实验过程无需人员值守；3、目标产物回收率高。

【缺点】：1、需要摸索合适的阈值，设定过高会导致收率下降；设定过低会频繁误触发；2、两个距离很近、重叠严重的色谱峰，很难实现准确切峰。

万立小建议：阈值收集适合样品组分相对明确、分离度较好、常规单体化合物纯化实验。

三、时间收集，脱离检测器信号的“定时器”

从色谱开始运行那一刻起，按照预先设定好的时间间隔，系统在对应时间窗口内将流出液导入指定试管，窗口之外则排入废液。

【优点】：1、操作简单，不受基线波动、检测器信号异常的干扰；2、参数可控，每一段洗脱时间对应的馏分清晰。

【缺点】：1、如果保留时间发生漂移，时间收集也会偏；2、无法自动识别目标峰，需要结合图谱判断。3、可能会造成产物拆分（跨两根试管）。

万立小建议：时间收集更适合稳定性已验证、日常重复性很高的场景，不适合方法开发初期。

四、手动收集，原始+灵活，但依赖人工

手动收集是色谱发展早期就存在的操作方式，操作人员实时观察电脑端实时出现的色谱曲线图或检测器信号，手动操作开启/停止/切换，来完成馏分收集，不受仪器自动程序限制。

【优点】：具有灵活性，可以临场调整收集位置。

【缺点】：1、须有人在岗值守，耗费人力；2、收集结果受人为操作因素，收集结果重复性较差；3、通量低。

万立小建议：手动收集更适合作为“备用方案”，在日常实验中，可优先考虑自动化收集模式，在特殊情况下再换成手动干预。

五、全波段收集，DAD检测器带来的多维选择性

全波段收集是近年来随着DAD检测器普及，而逐渐得到应用的先进模式，可同时读取多个波长信号，任意一个波长信号达到阈值，即可启动馏分收集。

【优点】：1、解决多组分、不同物质吸收波长不一致的难题；2、不用反复多次调整波长重新跑样；3、大幅提升多成分样品的收集成功率。

【缺点】：1、需要操作者对样品的紫外吸收特性有充分了解；2、若杂质在监测波长下有吸收，会连带杂质一起被收集。

万立小建议：全波段收集对检测器和软件的数据处理能力要求较高。

六、废液收集，易被忽视的一种方式

废液收集属于馏分收集的配套管理功能，系统在非收集时间段内，自动将流出液导入废液，避免不必要的溶剂进入收集试管。

【优点】：1、避免无效馏分占用收集管；2、废液集中管理，实验室流程更整洁。

万立小建议：废液收集一般和阈值收集等模式配合使用，没有达到收集条件的流出液，自动排入废液，只有目标馏分转入收集架试管。

为什么你的制备液相，需要集齐多种馏分收集能力？

在选购制备液相色谱仪时，不止要关注泵压力、色谱柱、检测器波长范围等功能，也要考虑馏分收集功能，这样才能开展多样化纯化项目。一台功能完备的制备液相色谱系统，应当支持多种收集模式切换，一套设备应对不同阶段的实验需求。

万立仪器Isolation系列制备液相色谱仪，内置功能强大的馏分收集工作站，一站式搭载全收集、阈值收集、手动收集、时间收集、全波段收集、废液收集六大主流收集方式，可适配高校实验室、药企研发、天然产物研究所、化工合成实验室等不同用户的纯化工作。软件操作界面简洁直观，所有收集参数可视化设置，降低样品损失，保障每一次纯化实验的数据可追溯、结果可复现。

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