凝胶色谱|上海杜凯生物
一、凝胶色谱仪日常维护
流动相管理
每日使用前检查流动相的纯度,避免杂质污染系统。定期更换流动相(建议每2-3天更换一次),防止微生物滋生或溶剂挥发导致浓度变化。使用前需过滤(0.45μm滤膜)并脱气(超声或在线脱气装置),减少气泡对检测信号的干扰。
泵系统维护
每周清洗泵头及单向阀,用甲醇或异丙醇冲洗30分钟,去除残留样品或盐沉积。定期检查泵密封圈磨损情况,若发现泄漏需立即更换,防止压力波动影响流速稳定性。
检测器保养
每月清洁检测池(如紫外检测器),用异丙醇或甲醇轻轻擦拭窗口,避免指纹或污渍降低灵敏度。若使用示差折光检测器,需保持恒温槽温度稳定(±0.1℃),防止基线漂移。
数据系统校准
每季度校准仪器时间参数(如流速、柱温),确保与软件设置一致。定期备份色谱工作站数据,防止丢失或误操作导致实验记录丢失。
二、色谱柱保养规范
安装与存储
安装色谱柱时,确保流动相流向与柱身箭头一致,避免反向冲洗导致填料塌陷。长期不用时,用甲醇或保存溶剂冲洗柱子,两端密封后存放于4℃冰箱,防止填料干裂或微生物生长。
使用前冲洗
新柱或长期未使用的色谱柱需先用5-10倍柱体积的流动相平衡,去除保存溶剂或杂质。更换流动相时,需用过渡溶剂(如甲醇-水混合液)逐步替换,避免pH或极性突变损坏填料。
压力与流速控制
运行过程中保持柱压稳定(通常<15MPa),避免高压冲击导致填料压实不均。流速设置需在色谱柱推荐范围内(如0.5-1.0mL/min),过高或过低均会影响分离效果。
清洗与再生
若柱效下降或出现肩峰,需用强溶剂(如甲醇、乙腈)冲洗20-30倍柱体积,去除吸附的强保留物质。对严重污染的色谱柱,可采用反向冲洗(需确认填料耐受性)或专用再生试剂处理。
凝胶色谱
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